果胶酯酶

 

果胶酯酶（pectinesterase）为pectin pectylhydrase之常用名，亦称为果胶酶、果胶甲酯酶、果胶氧化酶。为催化果胶的甲氧酯水解产生果胶酸和甲醇反应的酶。EC3·1·1·11。除广泛分布于高等植物外，已知在霉菌、细菌中也存在。对脱酯反应的底物特异性尚不十分清楚。因此酶在高等植物中几乎仅作用于甲酯，所以有对此酶应使用果胶甲酯酶这一名称的意见。活性测定是以果胶为底物，对在一定条件下产生的羧基用碱定量；另也有通过对所产生的甲醇进行定量的方法。最适pH为8—4，视酶源而异。一些阳离子特别是Na+、Ca2+等可提高此酶的活性。

 

一种DNA构建体，此构建体包含编码显示果胶酯酶活性的酶的DNA序列，其中所说的DNA序列包含：a）克隆进存在于大肠杆菌DSMI0357中的质粒pYES2．1中的DNA序列的果胶酯酶编码部分，或b）a）中限定的DNA序列的类似序列，该序列i）与a）中限定的DNA序列至少60%是同源的，或ii）与SEQIDNO：l中位置4-933中显示的DNA序列在低严格性下杂交，或iii）编码一种多肽，该多肽与白包含a）中限定的DNA序列的DNA序列编码的多肽至少50%是同源的，或iV）编码一种多肽，该多肽与针对由a）中限定的DNA序列编码的纯化的果胶酯酶产生的抗体是免疫反应性的。

采用明胶加戊二醛包埋法和蛋壳微粒吸附法分别对黑曲霉果胶酯酶进行了固定化，并研究了两种固定化方法制备得到的固定化黑曲霉果胶酯酶的酶学性质。结果表明，通过固定化，黑曲霉果胶酯酶的各项酶学性质指标都得到了改善，明胶固定化果胶酯酶和蛋壳固定化果胶酯酶的酶活回收率分别为46．3%和42.2%，而且与游离果胶酯酶相比，两种固定化酶的最适温度都由40℃上升到45℃，最适pH由4．4下降到4．0和4．2，Km值0．0113%由下降到0．0033%和0．0027%。 

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